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    經(jīng)過(guò)幾十年的發(fā)展，DNA 測(cè)序技術(shù)取得了令人矚目的成就，主要可以劃分為三代測(cè)序技術(shù)。1977年，Sanger等提出雙脫氧鏈末端終止法的DNA測(cè)序技術(shù)，又稱Sanger法測(cè)序 。作為第一代測(cè)序技術(shù)，這種方法依賴放射性同位素標(biāo)記來(lái)實(shí)現(xiàn)，操作繁瑣，未能實(shí)現(xiàn)自動(dòng)化，不能夠滿足大規(guī)模測(cè)序的要求。20世紀(jì)80年代末，熒光標(biāo)記逐漸取代同位素標(biāo)記，可以通過(guò)分析熒光信號(hào)來(lái)確定DNA序列。由于該類測(cè)序法仍然依賴凝膠電泳分離技術(shù)，其分析速率、并行化程度以及測(cè)序成本很難進(jìn)一步改善。與Sanger測(cè)序法相比，第二代測(cè)序技術(shù)不需要電泳設(shè)備，操作簡(jiǎn)便，成本低廉，集成化、自動(dòng)化程度高，能夠?qū)崿F(xiàn)高通量測(cè)序，為以后大規(guī)模平行測(cè)序的平臺(tái)奠定了技術(shù)基礎(chǔ)。目前已取得了廣泛的應(yīng)用，但由于其測(cè)序過(guò)程是基于PCR擴(kuò)增技術(shù)，在讀長(zhǎng)、成本和準(zhǔn)確性等方面也不夠理想。第三代測(cè)序技術(shù)在測(cè)序讀長(zhǎng)這一方面在很大程度上優(yōu)于第二代測(cè)序技術(shù)，而且還具有高通量、低成本、耗時(shí)短等優(yōu)點(diǎn)，但其技術(shù)缺陷是會(huì)出現(xiàn)插入和缺失錯(cuò)誤，并行化的問(wèn)題也有待解決。目前，第三代測(cè)序技術(shù)處于初步發(fā)展階段，仍有待創(chuàng)新和完善。

參考文獻(xiàn)：Progress in chemistry,2016,28(1);58-66